腫瘤類(lèi)器官是將患者來(lái)源的新鮮腫瘤組織經(jīng)體外三維（3D）細胞培養系統建立的、與患者腫瘤特征高度相似的一種立體模型，因此“類(lèi)器官”也常被稱(chēng)為“微器官”，即類(lèi)似組織器官之意^［6］?；谀壳皣鴥韧庋芯?，腫瘤類(lèi)器官培養方法有多種，如工程基質(zhì)膠細胞支架法、微流控培養法、旋轉生物反應器法等。其 中，工程基質(zhì)膠細胞支架法目前應用較多^［7］，不同團隊常根據自身需求選擇合適的培養方法。此外，不同類(lèi)型腫瘤由于生物學(xué)行為差異較大，體外類(lèi)器官建模的成功率也有差異。如目前上皮來(lái)源腫瘤（如結直腸癌、胃癌等）的體外類(lèi)器官培養報道較多，成功率較高，但非上皮來(lái)源腫瘤的體外類(lèi)器官培養報道相對較少。對于培養成功的類(lèi)器官，大部分研究證實(shí)其與患者腫瘤病理組織學(xué)特征、分子特征、藥物敏感性、遺傳穩定性等保持較高的一致性，且可在體外長(cháng)期培養與穩定傳代^［8?11］，因此腫瘤類(lèi)器官已逐漸被推薦為臨床指導個(gè)性化用藥的體外模型之一。有報道類(lèi)器官準確性可達80%^［12?19］，也因此受到全球該領(lǐng)域專(zhuān)家的廣泛關(guān)注和積極探索，這為類(lèi)器官的臨床應用及本共識的制定提供了積極的證據。當然，目前大部分數據均基于觀(guān)察性研究、共臨床研究（co?clinical trial）及前瞻性個(gè)案報道，但是腫瘤類(lèi)器官研究不斷開(kāi)展，尤其是正在進(jìn)行或即將開(kāi)展的基于類(lèi)器官的前瞻性、干預性、大樣本臨床研究結果將為本共識的再次修訂提供重要依據。

隨著(zhù)新藥研發(fā)的快速發(fā)展，抗腫瘤藥物數量越來(lái)越多，臨床主要的抗腫瘤藥物類(lèi)型可歸納為三大類(lèi)，包括細胞毒藥物（化療藥物如紫杉醇、順鉑/卡鉑、5?FU等）、靶向藥物（靶向EGFR、HER2、VEGFR等靶點(diǎn)的藥物）以及以免疫檢查點(diǎn)抑制劑為代表的免疫治療藥物（PD?1抗體、PD?L1抗體等）。在臨床實(shí)踐用藥中，為了更好地殺滅腫瘤，大部分患者接受聯(lián)合用藥治療如化療藥物聯(lián)合、靶向藥物聯(lián)合化療、免疫藥物聯(lián)合化療、靶向聯(lián)合免疫治療等，只有少部分患者接受單一的化療藥物、靶向藥物或免疫藥物治療。腫瘤類(lèi)器官藥物敏感性檢測類(lèi)似體外培養細胞系的藥物敏感性檢測，既可以檢測化療藥物又可以檢測大部分靶向藥物；既可以對單一藥物進(jìn)行檢測，也可以對藥物組合進(jìn)行檢測。

化療藥物主要通過(guò)作用于腫瘤細胞的DNA、蛋白質(zhì)等發(fā)揮作用，幾乎所有的化療藥物都沒(méi)有明確的療效預測標志物，因此基因分子分型檢測對化療藥物的精準選擇指導性有限。對于細胞類(lèi)型主要為腫瘤細胞的類(lèi)器官來(lái)說(shuō),大部分化療藥物均可在腫瘤類(lèi)器官中檢測其敏感性，相關(guān)研究也已較多^［20］。但對于某些需經(jīng)過(guò)體內代謝生成抗腫瘤活性成分發(fā)揮作用的化療藥物（如卡培他濱、伊立替康等），其原形藥物不可以直接用于類(lèi)器官藥物敏感性檢測，在沒(méi)有更好的替代檢測情況下，建議用相應的活性代謝產(chǎn)物進(jìn)行藥物敏感性檢測，如用 5?FU 代替卡培他濱、用 SN?38代替伊立替康等^［21］，因此在檢測化療藥物敏感性時(shí)，還要考慮其是否需要體內代謝發(fā)揮作用。

對于已獲批臨床應用或正在進(jìn)行臨床研究的靶向藥物，大部分藥物的應用具有明確的獲益群體篩選標志物，因此基因分子分型檢測對這部分藥物的選擇非常重要，如 EGFR 敏感突變、ALK/ROS1融合、c?KIT突變、HER2過(guò)表達/擴增、KRAS野生型、MET擴增/突變等。大部分靶向藥物特異性針對腫瘤細胞進(jìn)行殺滅，除了根據基因分子分型進(jìn)行藥物選擇外，同樣可以在腫瘤類(lèi)器官中進(jìn)行藥物敏感性檢測以指導患者用藥^{［18，20］}。在臨床實(shí)踐中也會(huì )結合患者的基因分子分型與類(lèi)器官藥物敏感性檢測結果進(jìn)行綜合判斷^［22?23］。但對于某些靶向藥物，如抗血管生成靶向藥物，其在進(jìn)行類(lèi)器官藥物敏感性檢測前，還需考慮其具體的作用位點(diǎn)及其發(fā)揮作用機制。如阿昔替尼（axitinib）通過(guò)作用于血管內皮細胞的 VEGFR?1/2/3發(fā)揮作用，但體外培養的腫瘤類(lèi)器官中并不包含血管結構，因此不可用單獨的腫瘤類(lèi)器官進(jìn)行抗血管生成藥物的藥物敏感性檢測，可通過(guò)對腫瘤類(lèi)器官血管化進(jìn)行藥物敏感性檢測。

免疫治療藥物如免疫檢查點(diǎn)抑制劑發(fā)揮作用需要體內腫瘤免疫微環(huán)境參與。利用患者腫瘤組織培養的腫瘤類(lèi)器官，雖然在最初幾代（一般是最初的 1~2代）類(lèi)器官中能檢測出比例較低的免疫細胞，但這些免疫細胞數量和構成遠無(wú)法代表患者體內腫瘤免疫微環(huán)境組成，因此不建議用單獨的腫瘤類(lèi)器官進(jìn)行免疫治療藥物的藥物敏感性檢測，免疫治療藥物的應用應遵從臨床診療指南或共識。若未來(lái)條件成熟，可通過(guò)腫瘤類(lèi)器官與免疫細胞共培養技術(shù)進(jìn)行藥物敏感性檢測^［24?26］。

作為精準醫療時(shí)代的一種新型檢測技術(shù)，腫瘤類(lèi)器官藥物敏感性檢測指導患者用藥選擇仍處于起步階段^{［15，17?18，27?30］}，應以“一切以患者為中心，提高患者治療獲益”為宗旨，并根據患者的個(gè)人需求及臨床醫師的綜合評估，選擇性建議進(jìn)行腫瘤類(lèi)器官藥物敏感檢測。在臨床實(shí)踐中，對于臨床診療指南有明確標準且證據級別較高的治療方案，推薦患者按照指南規范優(yōu)先選擇。而對于標準治療失敗的患者、目前尚缺乏標準治療的罕見(jiàn)或難治性腫瘤患者以及現有指南推薦級別較低且很可能無(wú)法從指南推薦方案中獲益的患者等，在征得患者知情同意下，可建議進(jìn)行腫瘤類(lèi)器官培養和藥物敏感性檢測，為其藥物選擇提供參考，同時(shí)也可以鼓勵患者參加合適的臨床試驗。

在臨床實(shí)踐中，尤其在精準醫療時(shí)代，“同病異治，異病同治”現象愈加凸顯，因此醫師的經(jīng)驗性治療尤為重要。同樣的，腫瘤類(lèi)器官藥物敏感性檢測的應用場(chǎng)景也并非一成不變，除了上述應用場(chǎng)景，醫師還可在下述情況下根據患者意愿推薦其進(jìn)行腫瘤類(lèi)器官藥物敏感性檢測：⑴多原發(fā)腫瘤患者或臨床治療很棘手的患者無(wú)法決定治療策略時(shí)，可根據類(lèi)器官生長(cháng)情況及藥物敏感性檢測結果，建議選擇的藥物方案與順序；⑵在臨床上，醫師可根據患者情況向其推薦超說(shuō)明書(shū)適應癥的藥物，在遵守相應法律法規條件下，可建議患者進(jìn)行類(lèi)器官藥物敏感性檢測，綜合判斷超說(shuō)明書(shū)適應癥藥物的潛在療效；⑶研究者發(fā)起的基于腫瘤類(lèi)器官藥物敏感性指導患者個(gè)性化治療的前瞻性臨床研究^［31］?？傊?，腫瘤類(lèi)器官藥物敏感性檢測的應用場(chǎng)景因人而異，未來(lái)隨著(zhù)該技術(shù)的不斷完善及醫師和患者對該領(lǐng)域認識的提高，其應用可能越來(lái)越多。此外，在體外腫瘤類(lèi)器官培養成功后，臨床醫師可根據對患者腫瘤及治療情況的綜合判斷，決定擬優(yōu)先檢測的藥物或藥物組合，從而為患者用藥選擇提供參考。

腫瘤類(lèi)器官藥物敏感性檢測涉及患者腫瘤組織的采集和使用，以及后續可能應用的藥物干預性治療等環(huán)節，藥物敏感性檢測不管是在醫療機構還是在第三方檢測單位進(jìn)行，在開(kāi)展之前必須與患者簽署知情同意書(shū)，在遵守相應法律法規和規章制度的前提下開(kāi)展^［32］。若患者參與前瞻性臨床研究，則該臨床研究必須經(jīng)單位倫理委員會(huì )審核批準，并在相關(guān)的臨床研究登記平臺進(jìn)行注冊公示。由于類(lèi)器官藥物敏感性檢測是較新的探索性應用技術(shù)，目前尚無(wú)統一的流程標準，因此不同檢測單位與患者簽署知情同意書(shū)的內容或方式也可能不同，患者按照檢測單位要求執行即可。

患者腫瘤組織樣本主要在醫療機構通過(guò)手術(shù)或活檢等手段采集，采集樣本前會(huì )常規簽署一份樣本采集知情同意書(shū)，知情同意書(shū)的內容不同醫療機構大同小異。采集的腫瘤組織樣本在醫療機構或第三方檢測單位進(jìn)行藥物敏感性檢測前，檢測單位會(huì )與患者簽署一份腫瘤類(lèi)器官藥物敏感性檢測相關(guān)知情同意書(shū)，就一系列相關(guān)事項或問(wèn)題向患者說(shuō)明，包括但不限于下述方面：⑴送檢的腫瘤組織由于體積、腫瘤細胞含量或腫瘤組織污染等原因，不能保證類(lèi)器官 100% 培養成功；⑵培養成功的類(lèi)器官，擬開(kāi)展多少藥物或藥物組合的藥物敏感性檢測；⑶該藥物敏感性檢測結果僅供臨床治療參考，無(wú)法完全反映患者用藥實(shí)際療效情況；⑷整個(gè)藥物敏感性檢測過(guò)程中每階段的收費標準；⑸預計檢測報告的反饋時(shí)間；⑹送檢的組織樣本僅用于藥物敏感性檢測，不做他用；⑺剩余組織樣本的處理方式。取得檢測報告后，后續治療無(wú)論是否根據類(lèi)器官藥物敏感性檢測結果進(jìn)行選擇，醫師均會(huì )按常規診療流程為患者制定治療方案。

腫瘤組織的質(zhì)量直接決定類(lèi)器官培養成功與否，因此類(lèi)器官培養前的腫瘤組織采集、保存、運輸環(huán)節很重要^［32?33］。如上所述，腫瘤組織樣本常在醫療機構通過(guò)手術(shù)或活檢等手段采集，因此在采集樣本時(shí)，應要求采集人員在保證患者安全及滿(mǎn)足常規病理檢測需求前提下，盡量多采集腫瘤細胞含量高的腫瘤組織（所取的腫瘤組織量目前并無(wú)標準，均可嘗試培養），并盡量縮短組織樣本在空氣中暴露的時(shí)間，以減少污染概率；采集的腫瘤組織樣本盡快置于裝有專(zhuān)用樣本保存液（保存液由檢測單位提前備好）的無(wú)菌管中，低溫（盡量保持在4 ℃左右，溫度略微浮動(dòng)影響不大）下快速運轉至檢測單位（盡量保證采樣后2~4 h內送到，時(shí)間略微浮動(dòng)對組織影響不大）；若檢測單位為采樣所在的醫療機構，一般可及時(shí)轉運；若樣本需送至第三方檢測單位，應盡量保證樣本及時(shí)送達。若因客觀(guān)原因致使樣本送達時(shí)間較長(cháng)，檢測單位在收到樣本后也應盡量處理樣本嘗試類(lèi)器官培養。此外，在提供腫瘤組織樣本時(shí)，應同時(shí)盡可能提供患者詳細的腫瘤信息，如腫瘤類(lèi)型/分期、采樣的腫瘤部位、患者前期接受的抗腫瘤治療情況、采樣方法、標本采集時(shí)間等，這些信息對樣本處理或判斷后續類(lèi)器官培養成功率等具有參照價(jià)值。

腫瘤類(lèi)器官培養與藥物敏感性檢測技術(shù)要求較高，目前均在具有檢測資質(zhì)的醫療機構或第三方檢測單位進(jìn)行，雖然不同檢測單位采用的方法可能不同，但均具備了可靠的質(zhì)量控制體系和操作流程，類(lèi)器官的建立以及鑒定的標準也已有研究報道^{［32，34］}。本共識主要圍繞“如何基于類(lèi)器官藥物敏感性結果指導臨床精準治療”展開(kāi)，對腫瘤類(lèi)器官培養及藥物敏感性檢測的詳細操作細節和步驟（如組織消化、培養基成分、換液、藥物濃度梯度設計、測試的復孔數、數據讀取設備等）不做描述。

類(lèi)器官藥物敏感性檢測結束后，檢測結果由醫療機構或第三方檢測單位以紙質(zhì)版或電子版報告形式呈現，并反饋給患者或接診醫師。不同檢測單位出具的報告結果呈現方式可能不同，藥物敏感性檢測報告有以腫瘤生長(cháng)抑制（tumor growth inhibition，TGI）形式呈現，以半數抑制濃度（IC50）形式呈現，還有以幾分類(lèi)法（如二分類(lèi)法分出的敏感和耐藥，三分類(lèi)法分出的敏感、一般、耐藥等）呈現^［18］。但是，無(wú)論以何種方式呈現結果，檢測單位均會(huì )根據其內部標準和參照數據，對檢測結果做總結性概述，為臨床醫師提供參考。此外，報告中一般盡可能展示其他詳細信息，如樣本處理后類(lèi)器官培養當天的細胞顯微鏡下圖片、用藥前顯微鏡下的類(lèi)器官圖片、培養成功的類(lèi)器官大概數量/直徑、藥物敏感性檢測曲線(xiàn)圖、藥物敏感性結果判斷的參考文獻信息等。

如前所述，雖然檢測報告中會(huì )給出結論性描述，但是由于腫瘤類(lèi)器官藥物敏感性檢測是一種新型的探索性應用技術(shù)，基于目前的報道數據，尚無(wú)法按照臨床診療指南給出推薦的用藥等級。由于腫瘤疾病的復雜性，進(jìn)行類(lèi)器官培養與藥物敏感性檢測的患者大多是臨床治療較棘手的患者，建議有條件的單位組織多學(xué)科討論，根據患者具體病情，對類(lèi)器官藥物敏感性檢測結果及患者樣本的基因分型等結果進(jìn)行綜合判斷，為患者制定最安全且和最有可能獲益的單藥或聯(lián)合用藥策略。